- 化学工业出版社
- 9787122218834
- 1版
- 142995
- 16开
- 2015-02
- 258
- 194
- ①Q78
- 生物
- 本科
作者简介
内容简介
本书分四个部分介绍基因工程原理与技术,即:(1)基因工程操作的四个基本条件——工具酶、载体、受体细胞和目的基因;(2)基因工程的主要操作技术路线——目的基因的分离制备、重组子的构建、重组子的转移、重组子的筛选和鉴定、克隆基因的表达;(3)转基因生物,包括植物、动物和微生物;(4)基因工程的安全性,包括实验操作的安全性和转基因生物的安全性。本书除重点介绍基因工程的基本理论外,还引用了最新的科研成果,力求新颖和易懂。
本书可作为生物、农林、医学和制药专业本科生的参考教材,也可以作为该领域中研究人员的参考书使用。
本书可作为生物、农林、医学和制药专业本科生的参考教材,也可以作为该领域中研究人员的参考书使用。
目录
第1章绪论1
11基因工程的基本定义1
12基因工程的诞生1
13基因工程的发展历程3
14基因工程的技术路线4
15基因工程的研究内容5
151克隆工具5
152基因克隆技术6
153目的基因6
154基因工程的应用研究6
155基因工程的安全性研究6
16学习和研究基因工程的意义7
复习题8
第2章基因工程的工具酶9
21限制性核酸内切酶9
211限制性内切酶的发现与分类9
212限制性核酸内切酶的命名11
213Ⅱ型限制性核酸内切酶的基本特性11
214影响限制性核酸内切酶酶解反应的因素13
215限制性核酸内切酶的应用14
22DNA连接酶14
221DNA连接酶的种类14
222DNA连接酶的机理15
223影响DNA连接酶的反应条件15
23DNA聚合酶15
231大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ16
232Klenow片段16
233T4噬菌体DNA聚合酶17
234T7噬菌体DNA聚合酶17
235测序酶17
236Taq DNA聚合酶17
237反转录酶18
24其他工具酶18
241末端脱氧核苷酸转移酶18
242T4多核苷酸激酶18
243碱性磷酸酶19
244单链核酸内切酶19
245核酸外切酶19
246甲基化酶20
复习题20
第3章基因工程载体21
31质粒22
311质粒的基本生物学特性22
312构建质粒克隆载体的策略23
313质粒载体的构建24
314质粒的种类和用途25
315经典的大肠杆菌质粒载体26
316质粒载体的稳定性问题29
32噬菌体载体30
321λ噬菌体载体30
322M13噬菌体载体32
33噬菌体质粒杂合载体33
331柯斯质粒载体33
332噬菌粒载体35
34人工染色体载体35
341酵母人工染色体载体36
342细菌人工染色体载体37
343P1人工染色体载体37
344哺乳动物人工染色体38
345人类人工染色体38
346植物人工染色体38
复习题39
第4章受体细胞40
41原核受体细胞40
411大肠杆菌41
412枯草芽孢杆菌41
413蓝细菌41
42真菌受体细胞42
421酵母菌42
422丝状真菌42
43真核受体细胞43
431植物细胞43
432动物细胞45
复习题45
第5章目的基因的制备46
51直接分离法47
511限制性内切酶酶切分离法47
512利用酶促反转录法直接从特定mRNA分离基因47
513机械方法47
514物理化学法47
52化学合成法48
521化学合成法的原理48
522化学合成法的步骤49
523化学合成法的应用49
53PCR扩增目的基因49
531PCR反应特点50
532PCR克隆目的基因51
533PCR技术改造已知基因54
54构建基因文库分离目的基因55
541基因文库的构建56
542基因文库构建的注意事项56
543基因组文库与cDNA文库的区别58
544克隆的鉴定方法59
55根据基因的差异表达分离目的基因60
551mRNA差别显示技术60
552抑制性消减杂交60
553酵母双杂交技术分离目的基因63
复习题64
第6章DNA重组的操作65
61重组子的构建65
611相同黏性末端连接65
612不同黏性末端的连接66
613平末端连接67
614修饰黏性末端连接67
615PCR产物的连接68
616影响外源DNA片段与载体DNA连接反应的因素70
62重组DNA分子的转化和扩增71
621Ca2+诱导转化71
622电穿孔转化方法72
623接合转化法72
624λ噬菌体转导法73
625转染73
626转化率及其影响因素73
63重组子的筛选与鉴定75
631表型筛选法75
632结构分析法78
633限制酶谱分析筛选78
634PCR扩增鉴定筛选79
635目的克隆的鉴定80
复习题86
第7章克隆基因在受体细胞中的表达调控87
71克隆基因在原核细胞中的表达调控87
711原核生物基因表达调控的特点88
712原核生物基因表达的表达系统88
713克隆基因在大肠杆菌中的表达调控89
72外源基因在真核细胞中的表达98
721真核生物基因表达与调控的特点98
722真核细胞表达系统99
复习题109
第8章转基因生物110
81转基因植物110
811转基因植物的技术路线110
812目的基因的选择与克隆111
813植物基因转化方法111
814转基因植物的筛选和鉴定118
815转基因植物中外源基因的沉默119
816提高目的基因在转基因植物中的高效表达策略120
817转基因植物的应用122
82转基因动物123
821转基因动物的基本操作过程123
822转基因动物的制备技术124
823外源基因导入动物细胞的方法124
824转基因动物的鉴定132
825转基因动物研究中出现的问题133
826提高外源基因在动物中的表达效率的策略134
827转基因动物的应用135
83转基因微生物137
831微生物基因工程的技术流程137
832微生物基因工程的应用137
复习题138
第9章基因工程的安全性139
91转基因生物的安全性139
911生物安全的含义与基本内容139
912转基因生物的环境安全性140
913转基因生物的健康性140
914与基因工程产品安全性有关的重要事件141
92生物安全政策、法规143
921国际社会对基因工程的态度与规则143
922我国基因工程安全管理措施144
93转基因生物的安全性评价144
94转基因生物的经济、伦理问题145
941转基因生物与国际贸易和社会经济问题145
942转基因生物的社会伦理问题146
复习题148
附录149
附录1基因工程相关网站149
附录2科研案例分析149
附录3中英文名词解释183
参考文献193
11基因工程的基本定义1
12基因工程的诞生1
13基因工程的发展历程3
14基因工程的技术路线4
15基因工程的研究内容5
151克隆工具5
152基因克隆技术6
153目的基因6
154基因工程的应用研究6
155基因工程的安全性研究6
16学习和研究基因工程的意义7
复习题8
第2章基因工程的工具酶9
21限制性核酸内切酶9
211限制性内切酶的发现与分类9
212限制性核酸内切酶的命名11
213Ⅱ型限制性核酸内切酶的基本特性11
214影响限制性核酸内切酶酶解反应的因素13
215限制性核酸内切酶的应用14
22DNA连接酶14
221DNA连接酶的种类14
222DNA连接酶的机理15
223影响DNA连接酶的反应条件15
23DNA聚合酶15
231大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ16
232Klenow片段16
233T4噬菌体DNA聚合酶17
234T7噬菌体DNA聚合酶17
235测序酶17
236Taq DNA聚合酶17
237反转录酶18
24其他工具酶18
241末端脱氧核苷酸转移酶18
242T4多核苷酸激酶18
243碱性磷酸酶19
244单链核酸内切酶19
245核酸外切酶19
246甲基化酶20
复习题20
第3章基因工程载体21
31质粒22
311质粒的基本生物学特性22
312构建质粒克隆载体的策略23
313质粒载体的构建24
314质粒的种类和用途25
315经典的大肠杆菌质粒载体26
316质粒载体的稳定性问题29
32噬菌体载体30
321λ噬菌体载体30
322M13噬菌体载体32
33噬菌体质粒杂合载体33
331柯斯质粒载体33
332噬菌粒载体35
34人工染色体载体35
341酵母人工染色体载体36
342细菌人工染色体载体37
343P1人工染色体载体37
344哺乳动物人工染色体38
345人类人工染色体38
346植物人工染色体38
复习题39
第4章受体细胞40
41原核受体细胞40
411大肠杆菌41
412枯草芽孢杆菌41
413蓝细菌41
42真菌受体细胞42
421酵母菌42
422丝状真菌42
43真核受体细胞43
431植物细胞43
432动物细胞45
复习题45
第5章目的基因的制备46
51直接分离法47
511限制性内切酶酶切分离法47
512利用酶促反转录法直接从特定mRNA分离基因47
513机械方法47
514物理化学法47
52化学合成法48
521化学合成法的原理48
522化学合成法的步骤49
523化学合成法的应用49
53PCR扩增目的基因49
531PCR反应特点50
532PCR克隆目的基因51
533PCR技术改造已知基因54
54构建基因文库分离目的基因55
541基因文库的构建56
542基因文库构建的注意事项56
543基因组文库与cDNA文库的区别58
544克隆的鉴定方法59
55根据基因的差异表达分离目的基因60
551mRNA差别显示技术60
552抑制性消减杂交60
553酵母双杂交技术分离目的基因63
复习题64
第6章DNA重组的操作65
61重组子的构建65
611相同黏性末端连接65
612不同黏性末端的连接66
613平末端连接67
614修饰黏性末端连接67
615PCR产物的连接68
616影响外源DNA片段与载体DNA连接反应的因素70
62重组DNA分子的转化和扩增71
621Ca2+诱导转化71
622电穿孔转化方法72
623接合转化法72
624λ噬菌体转导法73
625转染73
626转化率及其影响因素73
63重组子的筛选与鉴定75
631表型筛选法75
632结构分析法78
633限制酶谱分析筛选78
634PCR扩增鉴定筛选79
635目的克隆的鉴定80
复习题86
第7章克隆基因在受体细胞中的表达调控87
71克隆基因在原核细胞中的表达调控87
711原核生物基因表达调控的特点88
712原核生物基因表达的表达系统88
713克隆基因在大肠杆菌中的表达调控89
72外源基因在真核细胞中的表达98
721真核生物基因表达与调控的特点98
722真核细胞表达系统99
复习题109
第8章转基因生物110
81转基因植物110
811转基因植物的技术路线110
812目的基因的选择与克隆111
813植物基因转化方法111
814转基因植物的筛选和鉴定118
815转基因植物中外源基因的沉默119
816提高目的基因在转基因植物中的高效表达策略120
817转基因植物的应用122
82转基因动物123
821转基因动物的基本操作过程123
822转基因动物的制备技术124
823外源基因导入动物细胞的方法124
824转基因动物的鉴定132
825转基因动物研究中出现的问题133
826提高外源基因在动物中的表达效率的策略134
827转基因动物的应用135
83转基因微生物137
831微生物基因工程的技术流程137
832微生物基因工程的应用137
复习题138
第9章基因工程的安全性139
91转基因生物的安全性139
911生物安全的含义与基本内容139
912转基因生物的环境安全性140
913转基因生物的健康性140
914与基因工程产品安全性有关的重要事件141
92生物安全政策、法规143
921国际社会对基因工程的态度与规则143
922我国基因工程安全管理措施144
93转基因生物的安全性评价144
94转基因生物的经济、伦理问题145
941转基因生物与国际贸易和社会经济问题145
942转基因生物的社会伦理问题146
复习题148
附录149
附录1基因工程相关网站149
附录2科研案例分析149
附录3中英文名词解释183
参考文献193