第1章 绪论 001
【开篇案例】　色彩与科学的邂逅：色谱法的传奇开篇 001
1.1　色谱法的过去、现在和未来 002
1.1.1　色谱法的发展简史 002
1.1.2　色谱法的研究现状 003
1.1.3　色谱法的未来发展趋势 004
1.2　色谱法的概念与分类 005
1.2.1　色谱法 005
1.2.2　色谱法的类型 005
1.3　色谱法与其他分离方法的异同及其特点和不足 006
1.3.1　色谱法和其他分离方法的异同 006
1.3.2　色谱法的特点 006
1.3.3　色谱法的不足之处 006
1.4　色谱相关资讯 007
1.4.1　代表性色谱学术期刊 007
1.4.2　相关色谱网站 007
1.4.3　色谱微信公众号 008
1.4.4　色谱顶尖奖项 008
【团队协作项目】　色谱分析在食品检验中的应用与创新 009
【案例研究】　如何检测食用油中非法添加剂 010
参考文献 010

第2章 基础理论与定性定量方法 011
【开篇案例】　液相色谱柱内径的设计：分离效率与用户体验的完美融合 011
2.1　色谱参数 012
2.1.1　色谱流出曲线与色谱峰 012
2.1.2　对称因子 013
2.1.3　定性参数 013
2.1.4　定量参数 015
2.1.5　柱效参数 015
2.1.6　相平衡参数 016
2.1.7　分离参数 017
2.2　塔板理论能解释的色谱现象 018
2.2.1　塔板理论的基本假设 018
2.2.2　塔板模型与正态分布方程式 019
2.2.3　塔板模型的分离过程 021
2.2.4　理论塔板数和塔板高度 022
2.2.5　塔板理论的局限性 022
2.3　速率理论 023
2.3.1　气相色谱速率理论方程式 023
2.3.2　液相色谱速率理论方程式 026
2.4　色谱等温线、基本分离方程式与系统适用性试验 028
2.4.1　色谱等温线 028
2.4.2　基本色谱分离方程式及应用 029
2.4.3 系统适用性试验 030
2.5　分子间作用力及细胞膜色谱法 031
2.5.1　取向力 031
2.5.2　诱导力 032
2.5.3　色散力 032
2.5.4　氢键力 032
2.5.5　细胞膜色谱法 033
2.6　色谱法的定性与定量 034
2.6.1　定性分析方法 034
2.6.2　定量分析方法 035
【团队协作项目】　色谱分析在化妆品检验中的应用与创新 038
【案例研究】　如何检测维生素D 039
参考文献 039

第3章 气相色谱法 040
【开篇案例】　气相色谱揭秘：谁让英雄汉一脱鞋就尴尬？ 040
3.1 概述 041
3.1.1 气相色谱法的发展简史 041
3.1.2 气相色谱法的类型、应用范围 041
3.2 气相色谱仪的部件 042
3.2.1 气路系统 043
3.2.2 进样系统 044
3.2.3 分离系统 046
3.2.4 检测系统 046
3.2.5 控制系统 047
3.3 气相色谱柱的种类及特点 048
3.3.1 填充柱及其特点 048
3.3.2 毛细管柱及其特点 048
3.4 检测器类型与检测原理 049
3.4.1 热导检测器 049
3.4.2 火焰离子化检测器 050
3.4.3 电子捕获检测器 051
3.4.4 氮-磷检测器 052
3.4.5 火焰光度检测器 052
3.4.6 化学发光检测器 052
3.4.7 光离子化检测器 053
3.4.8 原子发射光谱检测器 054
3.4.9 红外光谱检测器 054
3.4.10 质谱检测器 054
3.5 气相色谱条件的优化 055
3.5.1 载气及流速 055
3.5.2 柱温的选择 055
3.5.3 气化室温度的选择 056
3.5.4 色谱柱柱长与内径 056
3.5.5 固定液配比 057
3.6 裂解气相色谱法 057
3.6.1 基本原理 058
3.6.2 常见裂解装置 058
3.6.3 应用范围 061
3.7 二维气相色谱法 062
3.7.1 中心切割二维气相色谱法 063
3.7.2 全二维气相色谱法 063
3.8 气相色谱法的应用案例 064
3.8.1 化学药品中挥发性有机化合物的检测 064
3.8.2 鸡蛋中氟虫腈残留物的检测 066
【团队协作项目】　气相色谱法在农药残留检测中的应用 067
【案例研究】　揭秘泥土的清香 068
参考文献 068

第4章 高效及超高效液相色谱法 069
【开篇案例】　净土重生：高效液相色谱法助力土壤污染防治 069
4.1 概述 069
4.1.1 高效液相色谱法发展简史 069
4.1.2 高效液相色谱法的特点 071
4.1.3 高效液相色谱法的类型、应用范围与局限性 071
4.1.4 高效液相色谱法与其他色谱方法的比较 073
4.2 高效液相色谱仪的组成部分 073
4.2.1 输液系统 073
4.2.2 进样系统 075
4.2.3 分离系统 077
4.2.4 检测系统 078
4.2.5 记录系统 079
4.2.6 仪器操作与维护 079
4.3 品种繁多的固定相 081
4.3.1 液-固色谱法固定相 081
4.3.2 液-液色谱法固定相 082
4.3.3 手性色谱法固定相 083
4.4 流动相的分类及洗脱方式 088
4.4.1 正相色谱流动相 088
4.4.2 反相色谱流动相 089
4.4.3 洗脱方式 089
4.5 检测器的种类及检测原理 090
4.5.1 紫外检测器及二极管阵列检测器 091
4.5.2 荧光检测器 092
4.5.3 示差折光检测器 092
4.5.4 蒸发光散射检测器 094
4.5.5 其他检测器 095
4.6 色谱分离条件的优化 095
4.6.1 色谱柱及柱温的选择 095
4.6.2 流动相的选择 097
4.6.3 洗脱方式的选择 098
4.7 超高效液相色谱法 099
4.7.1 基本原理 099
4.7.2 与高效液相色谱法的不同 100
4.8 高效液相色谱法的新进展 101
4.8.1 新填料与新技术 101
4.8.2 整体柱 102
4.8.3 多维液相色谱法 103
4.9 高效液相色谱法应用案例 104
4.9.1 化妆品分析应用案例 104
4.9.2 食品分析应用案例 106
【团队协作项目】　高效液相色谱法在《中国药典》（2025年版）中的应用 108
【案例研究】　如何检测减肥产品中是否掺杂了违禁品 109
参考文献 109

第5章 薄层色谱法 110
【开篇案例】　载玻片上的小发明，化学界的大突破：薄层色谱揭秘 110
5.1　概述 110
5.1.1　薄层色谱法的发展简史 111
5.1.2　薄层色谱法的特点 112
5.2　薄层色谱系统的组成部分 112
5.2.1　吸附剂 113
5.2.2　薄层板 114
5.2.3　点样 115
5.2.4　展开剂及展开方式 116
5.3　薄层色谱参数 119
5.3.1　定性参数 119
5.3.2　相平衡参数与比移值的关系 120
5.3.3　分离参数 120
5.3.4　板效参数 121
5.4　定性定量方法与柱色谱的不同 122
5.4.1　定性方法 122
5.4.2　定量方法 123
5.5　薄层色谱法研究进展 124
5.5.1　高效薄层色谱法 124
5.5.2　键合相薄层色谱法 126
5.6　薄层色谱法的应用案例 127
5.6.1　中草药和中成药成分分析 127
5.6.2　食品成分分析 128
【团队协作项目】　薄层色谱法在药品、食品和化妆品中的应用与挑战 130
【案例研究】　TLC揭露非法降糖药的秘密 131
参考文献 131

第6章 毛细管电泳法 132
【开篇案例】　电泳的“奥德赛”：从血清分离到毛细管电泳技术的科学之旅 132
6.1　概述 132
6.1.1　毛细管电泳法的发展简史 132
6.1.2　毛细管电泳法的特点及应用范围和局限性 133
6.2　毛细管电泳法的分离依据 134
6.2.1　双电层和Zeta电势 135
6.2.2　电泳和淌度 135
6.2.3　电渗流和电渗淌度 136
6.3 毛细管电泳仪的组成部分 136
6.3.1 毛细管 137
6.3.2 高压电源 138
6.3.3 进样系统 138
6.3.4 检测系统 138
6.4 毛细管电泳法的检测器及各检测器工作原理 139
6.4.1 紫外检测器 139
6.4.2 激光诱导荧光检测器 140
6.4.3 质谱检测器 141
6.4.4　其他类型检测器 142
6.5 毛细管电泳法的分离模式及原理 142
6.5.1　毛细管区带电泳法 142
6.5.2　胶束电动毛细管电泳法 143
6.5.3 毛细管凝胶电泳法 143
6.5.4　毛细管等电聚焦法 144
6.5.5 毛细管等速电泳法 144
6.5.6　毛细管电色谱法 145
6.5.7　其他类型的分离模式 145
6.6　毛细管电泳法分离条件的优化 146
6.6.1　进样方式 146
6.6.2　分离电压 147
6.6.3　缓冲液种类及pH值 147
6.6.4 添加剂 148
6.6.5 毛细管材质和柱长 148
6.6.6　柱温选择 149
6.7　毛细管电泳法新进展 149
6.7.1　手性毛细管电泳 149
6.7.2　芯片电泳 150
6.7.3　联用技术 150
6.8 毛细管电泳法的应用案例 151
6.8.1 生物大分子药物分析应用案例 151
6.8.2 化妆品分析应用案例 151
【团队协作项目】　CE在手性药物拆分和大分子分析中的应用研究 153
【案例研究】　如何利用毛细管电泳法检测疫苗中宿主细胞蛋白的残留量 153
参考文献 154

第7章 制备色谱法 155
【开篇案例】　从咖啡豆到药物：制备色谱法的分离纯化传奇故事 155
7.1 超临界流体色谱法 155
7.1.1 概述 155
7.1.2 超临界流体色谱仪的组成部分 157
7.1.3 色谱条件的选择 161
7.1.4 超临界流体色谱法应用案例 162
7.2 高速逆流色谱法 163
7.2.1 概述 163
7.2.2 高速逆流色谱仪的组成部分 164
7.2.3 高速逆流色谱条件的选择 170
7.2.4 高速逆流色谱法应用案例 174
【团队协作项目】　探究制备色谱技术在天然产物分离纯化中的应用与创新 175
【案例研究】　如何分辨食品是否安全 176
参考文献 176

第8章 生物大分子色谱分析法 177
【开篇案例】　跨越百年，胰岛素纯化之旅：从沉淀法到色谱技术 177
8.1　概述 177
8.1.1　生物大分子的种类 178
8.1.2　生物大分子的特性 178
8.1.3　生物大分子色谱分析法的发展简史与趋势 179
8.2　体积排阻色谱法 179
8.2.1　体积排阻色谱法的基本原理 180
8.2.2　体积排阻色谱法的固定相 181
8.2.3　体积排阻色谱法的流动相 182
8.2.4　体积排阻色谱法的操作与技巧 183
8.2.5　体积排阻色谱法的应用案例 184
8.3　离子交换色谱法 185
8.3.1　离子交换色谱法的基本原理 185
8.3.2　离子交换色谱法的固定相 186
8.3.3　离子交换色谱法的流动相 187
8.3.4　离子交换色谱法的应用案例 188
8.4　疏水作用色谱法 189
8.4.1　疏水作用色谱法的基本原理 190
8.4.2　疏水作用色谱法的填料 190
8.4.3　疏水作用色谱法的流动相 191
8.4.4　疏水作用色谱法的应用案例 192
8.5　亲和色谱法 193
8.5.1　亲和色谱法的基本原理 193
8.5.2　亲和色谱法的固定相 195
8.5.3　亲和色谱法的流动相 195
8.5.4 亲和色谱法的应用案例 196
【团队协作项目】　大分子色谱法在生物制药中的应用研究 198
【案例研究】　如何使用色谱法纯化护肤品中的透明质酸 199
参考文献 199

第9章 色谱联用技术 200
【开篇案例】　色谱质谱联用：守护食品安全的卫士 200
9.1　概述 201
9.1.1　色谱联用技术发展概况 201
9.1.2　色谱联用技术未来发展趋势 201
9.2　气相色谱与质谱联用接口问题的解决 202
9.2.1　气相色谱与质谱联用的仪器系统 202
9.2.2　气相色谱与质谱联用的接口技术 204
9.2.3　气相色谱与质谱联用中的离子化技术 205
9.2.4　气相色谱与质谱联用的质谱谱库 206
9.3　液相色谱与质谱联用接口问题的解决 207
9.3.1　液相色谱与质谱联用的仪器系统 207
9.3.2　液相色谱与质谱联用的接口技术 208
9.3.3　液质联用分析的优化与选择 210
9.4　毛细管电泳与质谱联用接口问题的解决 211
9.4.1　毛细管电泳与质谱联用的仪器系统 211
9.4.2　毛细管电泳与质谱联用的接口技术 212
9.5　其他联用技术 213
9.5.1　超临界流体色谱-质谱联用 213
9.5.2　气相色谱-傅里叶变换红外光谱联用 215
9.5.3　液相色谱-核磁共振光谱联用 216
9.5.4　样品前处理与色谱的在线联用 217
9.6　色谱-质谱联用案例分析 219
9.6.1　食品分析应用案例 219
9.6.2　药品分析应用案例 220
9.6.3　环境分析应用案例 220
【团队协作项目】　色谱质谱联用技术在生物分析中的应用与创新 222
【案例研究】　如何检测急性中毒患者血液中的毒物种类 223
参考文献 223

第10章 复杂样品前处理技术 224
【开篇案例】　葡萄酒中的“隐形”杀手 224
10.1　概述 225
10.1.1　进行样品前处理的原因 225
10.1.2　样品前处理应遵循的原则 226
10.2　常用的物理分离和浓缩手段 227
10.2.1　溶剂萃取技术 227
10.2.2　固相萃取技术 233
10.2.3　膜分离技术 234
10.2.4　其他样品前处理新技术 235
10.3　常用的化学衍生化法 237
10.3.1　气相色谱法常用的衍生化反应 237
10.3.2　液相色谱法常用的衍生化反应 238
10.4　样品前处理应用案例分析 239
10.4.1　生物样品前处理案例分析 239
10.4.2　食品前处理案例分析 241
【团队协作项目】　固相萃取技术在化妆品检测前处理中的应用与创新 243
【案例研究】　如何通过样品前处理技术分离并富集化妆品中的激素 243
参考文献 244

第11章 色谱分析方法的验证、转移和确认 245
【开篇案例】　从不确定到可控的突破 245
11.1　色谱分析方法的验证 246
11.1.1　方法验证的目的和重要性 246
11.1.2　方法验证的研究 247
11.1.3　方法验证的内容和参数 248
11.1.4　验证方案的设计 254
11.1.5　验证试验的执行与结果评估 255
11.2　色谱分析方法的转移 256
11.2.1　方法转移的必要性 256
11.2.2　方法转移的方法和要素 256
11.2.3　方法转移的方案设计 257
11.2.4　方法转移的结果评估和批准 258
11.2.5　方法转移中的常见问题及解决方案 258
11.3　色谱分析方法的确认 258
11.3.1　方法确认的定义和范围 258
11.3.2　方法确认的实验设计 259
11.3.3　方法确认的原则和指标 259
11.3.4　方法确认与验证的区别 259
11.4　案例分析 260
11.4.1　氧氟沙星的鉴别试验 260
11.4.2　有关物质的测定 260
11.4.3　氧氟沙星片的含量测定 262
【团队协作项目】　色谱分析方法的验证 263
【案例研究】　奶茶中咖啡因的含量测定 264
参考文献 264