第一部分基础微生物实验方法与技术
第一章显微技术1
第一节常用显微镜的构造1
一、普通光学显微镜(generalmicroscope)1
二、暗视野显微镜（暗场显微镜）(darkfieldmicroscope)4
三、相差显微镜（phasemicroscope）5
四、荧光显微镜（FlurecenceMicroscope）6
五、电子显微镜8
第二节常用显微镜的使用方法及注意事项11
一、普通光学显微镜的使用方法及注意事项11
二、暗视野显微镜的使用方法及注意事项13
三、相差显微镜的使用方法及注意事项14
四、荧光显微镜的使用方法及注意事项14
第二章微生物制片及染色技术15
第一节微生物的制片方法15
一、压滴标本制作无菌操作制片15
二、悬滴标本制作15
三、涂片法16
四、插片法16
五、搭片法16
六、玻璃纸法17
七、压片法（也称印片法）17
八、透明薄膜培养法17
九、单细胞菌块17
十、其他方法17
第二节微生物染色技术及形态观察17
一、染色基本原理及染料种类的选择17
实验21细菌单染色法及形态的观察18
实验22细菌的革兰染色法20
实验23细菌鞭毛染色及运动的观察22
实验24细菌芽孢、荚膜的染色及观察24
实验25放线菌活体染色及形态观察26
实验26霉菌的活体染色及形态观察27
第三章灭菌与除菌29
第一节实验室常用灭菌方法29
一、热灭菌29
二、过滤除菌33
三、紫外线杀菌35
四、化学药剂消毒与杀菌35
第二节各类培养基常采用的灭菌方法及注意事项37
一、各类培养基的灭菌法37
二、培养基灭菌的注意事项37
第四章培养基的配制39
第一节培养基的配制原则39
一、选择适宜的营养物质39
二、营养物质浓度及配比合适39
三、控制pH值条件40
第二节培养基的种类及配置过程40
一、培养基的种类40
二、培养基的配制方法43
实验41常用培养基的配置45
第五章微生物接种与培养技术48
第一节微生物的接种技术48
实验51微生物的各种接种方法48
第二节微生物的培养技术51
一、微生物培养的一般问题51
二、好气性微生物培养法52
三、厌气性微生物培养法55
实验52用厌氧袋法培养丙酮丁醇梭状芽孢杆菌59
第六章微生物的分离及鉴定技术62
第一节微生物的纯种分离方法62
一、稀释混合倒平板法62
二、稀释涂布平板法62
三、平板划线分离法63
实验61土壤微生物的分离技术63
第二节微生物生长的测定技术66
一、生长测定66
二、繁殖测定67
三、群体生长规律——生长曲线测定67
实验62微生物菌体大小的测定方法68
实验63微生物数量的测定70
实验64微生物生长曲线的测定72
第三节微生物生理特征测定技术73
实验65微生物需氧性的测定73
实验66微生物最适生长温度的测定74
实验67微生物生长pH值范围的测定74
实验68固氮能力的检测75
第四节微生物生化特征测定技术75
实验69糖类发酵实验75
实验610甲基红试验76
实验611淀粉水解试验77
实验612纤维素水解试验77
实验613果胶水解试验78
实验614细胞色素氧化酶试验79
实验615过氧化氢酶试验80
实验616TTC试验80
实验617硝酸盐还原试验81
实验618α淀粉酶活力的测定方法82
实验619蛋白酶活力的测定方法83
第七章菌种保藏技术86
实验71菌种的保藏方法86
第二部分环境微生物生态学实验方法与技术
第八章环境因素对微生物生长与死亡的影响93
第一节营养和氧气对微生物生长发育的影响93
实验81营养元素对微生物生长的影响93
实验82氧和CO2浓度对微生物生长的影响95
第二节物理和化学因素对微生物生长发育的影响97
实验83温度对微生物生长的影响97
实验84渗透压对微生物生长的影响98
实验85氢离子浓度对微生物生长的影响99
实验86化学药剂对微生物生长的影响100
第九章土壤微生物的生物量的测定方法102
实验91土壤微生物生物量碳的测定102
实验92土壤微生物生物量氮的测定104
实验93土壤微生物生物量磷的测定105
实验94土壤微生物生物量硫的测定107
第十章微生物多样性的测定方法109
第一节PCR技术的基本原理与方法109
实验101PCR扩增技术与方法110
实验102微生物总DNA中的16SrDNAPCR扩增技术112
实验103凝胶中DNA的回收、测序及系统发育树的构建113
第二节微生物多样性的测定方法114
实验104Biolog分析方法115
实验105PLFA分析方法117
实验106PCRDGGE分析方法120
第三部分环境微生物监测与评价技术
第十一章水中微生物监测123
第一节水样的采集和保存123
一、采样123
二、样品保存125
第二节水体中微生物数量的监测125
实验111水中细菌总数的监测125
实验112水中大肠菌群(Coliformgroup)的监测127
实验113水中粪链球菌的监测136
实验114水中病毒的监测139
实验115水体沉积物中的H2S产生菌的测定141
实验116循环水冷却系统中有关的微生物监测142
实验117应用PCR与基因DNA分子探针监测污染水体大肠杆菌146
实验118富营养化湖泊中藻类的监测（叶绿素a法）149
实验119PFU微型生物群落监测法151
第十二章土壤中微生物的监测155
第一节土样的采集及保存155
一、土壤环境样品采集155
二、样品的处理与保存157
第二节土壤中微生物数量及组成的监测158
实验121土壤中微生物数量的监测158
实验122微生物在自然界氮素循环中的作用159
实验123利用16SrDNA方法分析不同污染土壤中微生物种群的变化161
第十三章空气中微生物的监测164
第一节空气的采样方法及保存164
一、样品的采集方法164
第二节空气中微生物数量的监测166
实验131空气中细菌数量的监测166
第十四章生物毒理学检测与评价168
实验141发光菌的生物毒性测试方法168
实验142根据硝化细菌的相对代谢率检测环境污染物的综合生物毒性实验171
实验143采用细菌脱氢酶检测化合物毒性——水质毒性快速测定仪法173
实验144用Ames法检测环境中致癌物176
第四部分污染物微生物处理与资源化技术
第十五章污染物微生物处理技术180
第一节废水生物处理中的活性污泥180
实验151活性污泥微生物的显微镜观察及微型动物的计数180
实验152活性污泥中丝状微生物的鉴别186
实验153活性污泥脱氢酶活性的测定190
实验154活性污泥耗氧速率、废水可生化性及毒性的测定193
第二节微生物在污染物降解中的应用195
实验155光合细菌的培养及其对高浓度有机废水的净化作用195
实验156酚降解微生物的分离和解酚能力的测定196
实验157微生物对有机磷农药的降解198
实验158微生物对表面活性剂的降解200
实验159微生物细胞的固定化及其在废水生物处理中的应用202
实验1510微生物吸附法去除重金属203
实验1511生物过滤法对含氨废气的处理205
第十六章固体废物处理与资源化方法207
实验161垃圾堆肥中纤维素分解菌的计数和分离207
实验162利用酒精废液生产单细胞蛋白208
实验163固体废物的固体发酵212
参考文献214