- 高等教育出版社
- 9787040657760
- 1版
- 特殊
内容简介
本教材以科研思路的培养为基本出发点，内容涵盖六大模块（蛋白质、酶、糖类、脂质、核酸、物质代谢）以及生物信息学应用，包含76个基础实验、9个综合实验和4个拓展阅读（BOX）以及附录。教材从生物大分子的分离、纯化、鉴定，到酶学实验、代谢通路研究，再到现代生物技术在生物化学中的应用，系统整合了经典实验与前沿技术，形成完整而系统的生物化学知识架构。每个实验包含实验目的、实验原理、实验器材与试剂、实验步骤、实验结果与处理、分析思考及参考文献等内容。可供综合类、师范类等高等院校生物类专业本科教学使用，也可供相关专业的研究生、科研人员和生物学爱好者参考使用。
目录
目录
前辅文
第1章 蛋白质
1.1 蛋白质性质、序列和浓度的测定
实验1 蛋白质的氨基酸组分分析
实验2 蛋白质、多肽N端氨基酸残基的鉴定
实验3 蛋白质二硫键位置的确定
实验4 蛋白质变、复性实验
实验5 蛋白质相对浓度的测定
实验6 蛋白质绝对浓度的测定
1.2 蛋白质分离纯化
实验7 蛋白质的盐析沉淀
实验8 尺寸排阻色谱
实验9 离子交换层析
实验10 疏水层析
实验11 亲和层析
实验12 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验13 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验14 等电聚焦电泳
实验15 双向电泳
实验16 免疫印迹
1.3 蛋白质-蛋白质相互作用
实验17 化学交联
实验18 免疫共沉淀
实验19 捕拉分析
实验20 酶联免疫吸附
实验21 等温滴定量热
实验22 微量热泳动
实验23 表面等离子共振
实验24 共振能量转移
实验25 蛋白质片段互补
实验26 细胞内邻近标记
实验27 噬菌体展示
实验28 酵母双杂交系统
1.4 蛋白质三维结构测定
实验29 X射线晶体衍射法
实验30 核磁共振波谱
实验31 冷冻电子显微镜三维重构
综合实验1 利用超高分辨质谱技术鉴定蛋白质组
综合实验2 蛋白质的提纯、结晶、活性测定及三维结构解析
综合实验3 绿色荧光蛋白的重组表达、纯化及性质鉴定
第2章 酶
2.1 酶的性质和功能
实验32 酶催化活性影响因素的测定
实验33 酶动力学参数的测定
BOX1 酶催化协同效应的测定
2.2 酶的辅因子的性质和浓度测定
实验34 维生素B2的光谱分析
实验35 B族维生素的分离鉴定
实验36 维生素C的制备和定量测定
综合实验4 酵母蔗糖酶的分离纯化、性质鉴定及反应动力学实验
综合实验5 葡萄糖异构酶的分子克隆、异源表达、分离纯化和酶动力学分析
第3章 糖类
3.1 糖类的性质和浓度测定
实验37 糖类的鉴定及基本化学特性
实验38 还原糖的浓度测定
实验39 血糖的定量测定
实验40 单糖的定量测定
实验41 糖衍生物的检测
3.2 多糖的分离纯化和组成分析
实验42 多糖的分离纯化和组成分析
综合实验6 麦胚凝集素的制备及性质鉴定
第4章 脂质
4.1 脂质的性质和浓度测定
实验43 脂质的化学特性测定
实验44 血清胆固醇的定量测定
实验45 血清甘油三酯的定量测定
实验46 维生素A的定量测定
4.2 脂质的分离和鉴定
实验47 脂质的分离
实验48 脂质的鉴定
第5章 核酸
5.1 核酸的物理、化学性质和定量测定
实验49 DNA和RNA的区分
实验50 DNA双链的变性与复性
实验51 核酸的定量测定
5.2 核酸的生物学功能
实验52 质粒DNA的提取、酶切与鉴定
实验53 聚合酶链反应
实验54 逆转录PCR和实时荧光定量PCR
实验55 PCR产物的T-A克隆及重组子的蓝白斑筛选
实验56 DNA印迹分析
实验57 RNA印迹分析
实验58 电泳迁移率变动分析
BOX2 DNA是遗传物质的证明
综合实验7 蛋白质的无细胞体外转录和翻译
第6章 物质代谢
6.1 糖代谢
实验59 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成
实验60 α-葡萄糖苷的水解
6.2 氧化磷酸化
实验61 线粒体组分的分离和呼吸链复合体的酶学分析
实验62 细胞色素c的制备及含量测定
实验63 ATP合酶的分离纯化
6.3 脂代谢
实验64 脂肪的降解
实验65 脂肪酸的β氧化
6.4 核酸代谢
实验66 单细胞凝胶电泳检测DNA损伤
BOX3 DNA的半保留复制
6.5 蛋白质代谢
实验67 谷丙转氨酶的转氨基作用及活性测定
实验68 血清和尿液尿素的测定
6.6 激素代谢
实验69 甲状腺素浓度的测定
实验70 雌二醇浓度的测定
实验71 肾上腺素诱导细胞产生cAMP及ERK1/2蛋白磷酸化的测定
实验72 胰岛素对血糖浓度的影响
实验73 一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的测定
综合实验8 细胞氧化磷酸化和糖酵解功能测定
综合实验9 雌激素的提取、纯化和浓度测定
BOX4 血液不同生化指标与人体各器官功能的关系
第7章 生物信息学应用
实验74 生物信息学软件和网站的应用
实验75 依托京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库进行代谢基因、代谢通路、代谢产物及相关的生理病理效应分析
实验76 蛋白质三维结构的预测和模型构建
附录
附录1 生物化学实验室安全守则
附录2 实验报告撰写规则
附录3 试剂的配制和分级
附录4 硫酸铵饱和度计算表
附录5 常用缓冲液的配制
附录6 层析中常用介质的规格及性能
附录7 常用生物化学仪器使用方法
前辅文
第1章 蛋白质
1.1 蛋白质性质、序列和浓度的测定
实验1 蛋白质的氨基酸组分分析
实验2 蛋白质、多肽N端氨基酸残基的鉴定
实验3 蛋白质二硫键位置的确定
实验4 蛋白质变、复性实验
实验5 蛋白质相对浓度的测定
实验6 蛋白质绝对浓度的测定
1.2 蛋白质分离纯化
实验7 蛋白质的盐析沉淀
实验8 尺寸排阻色谱
实验9 离子交换层析
实验10 疏水层析
实验11 亲和层析
实验12 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验13 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验14 等电聚焦电泳
实验15 双向电泳
实验16 免疫印迹
1.3 蛋白质-蛋白质相互作用
实验17 化学交联
实验18 免疫共沉淀
实验19 捕拉分析
实验20 酶联免疫吸附
实验21 等温滴定量热
实验22 微量热泳动
实验23 表面等离子共振
实验24 共振能量转移
实验25 蛋白质片段互补
实验26 细胞内邻近标记
实验27 噬菌体展示
实验28 酵母双杂交系统
1.4 蛋白质三维结构测定
实验29 X射线晶体衍射法
实验30 核磁共振波谱
实验31 冷冻电子显微镜三维重构
综合实验1 利用超高分辨质谱技术鉴定蛋白质组
综合实验2 蛋白质的提纯、结晶、活性测定及三维结构解析
综合实验3 绿色荧光蛋白的重组表达、纯化及性质鉴定
第2章 酶
2.1 酶的性质和功能
实验32 酶催化活性影响因素的测定
实验33 酶动力学参数的测定
BOX1 酶催化协同效应的测定
2.2 酶的辅因子的性质和浓度测定
实验34 维生素B2的光谱分析
实验35 B族维生素的分离鉴定
实验36 维生素C的制备和定量测定
综合实验4 酵母蔗糖酶的分离纯化、性质鉴定及反应动力学实验
综合实验5 葡萄糖异构酶的分子克隆、异源表达、分离纯化和酶动力学分析
第3章 糖类
3.1 糖类的性质和浓度测定
实验37 糖类的鉴定及基本化学特性
实验38 还原糖的浓度测定
实验39 血糖的定量测定
实验40 单糖的定量测定
实验41 糖衍生物的检测
3.2 多糖的分离纯化和组成分析
实验42 多糖的分离纯化和组成分析
综合实验6 麦胚凝集素的制备及性质鉴定
第4章 脂质
4.1 脂质的性质和浓度测定
实验43 脂质的化学特性测定
实验44 血清胆固醇的定量测定
实验45 血清甘油三酯的定量测定
实验46 维生素A的定量测定
4.2 脂质的分离和鉴定
实验47 脂质的分离
实验48 脂质的鉴定
第5章 核酸
5.1 核酸的物理、化学性质和定量测定
实验49 DNA和RNA的区分
实验50 DNA双链的变性与复性
实验51 核酸的定量测定
5.2 核酸的生物学功能
实验52 质粒DNA的提取、酶切与鉴定
实验53 聚合酶链反应
实验54 逆转录PCR和实时荧光定量PCR
实验55 PCR产物的T-A克隆及重组子的蓝白斑筛选
实验56 DNA印迹分析
实验57 RNA印迹分析
实验58 电泳迁移率变动分析
BOX2 DNA是遗传物质的证明
综合实验7 蛋白质的无细胞体外转录和翻译
第6章 物质代谢
6.1 糖代谢
实验59 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成
实验60 α-葡萄糖苷的水解
6.2 氧化磷酸化
实验61 线粒体组分的分离和呼吸链复合体的酶学分析
实验62 细胞色素c的制备及含量测定
实验63 ATP合酶的分离纯化
6.3 脂代谢
实验64 脂肪的降解
实验65 脂肪酸的β氧化
6.4 核酸代谢
实验66 单细胞凝胶电泳检测DNA损伤
BOX3 DNA的半保留复制
6.5 蛋白质代谢
实验67 谷丙转氨酶的转氨基作用及活性测定
实验68 血清和尿液尿素的测定
6.6 激素代谢
实验69 甲状腺素浓度的测定
实验70 雌二醇浓度的测定
实验71 肾上腺素诱导细胞产生cAMP及ERK1/2蛋白磷酸化的测定
实验72 胰岛素对血糖浓度的影响
实验73 一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的测定
综合实验8 细胞氧化磷酸化和糖酵解功能测定
综合实验9 雌激素的提取、纯化和浓度测定
BOX4 血液不同生化指标与人体各器官功能的关系
第7章 生物信息学应用
实验74 生物信息学软件和网站的应用
实验75 依托京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库进行代谢基因、代谢通路、代谢产物及相关的生理病理效应分析
实验76 蛋白质三维结构的预测和模型构建
附录
附录1 生物化学实验室安全守则
附录2 实验报告撰写规则
附录3 试剂的配制和分级
附录4 硫酸铵饱和度计算表
附录5 常用缓冲液的配制
附录6 层析中常用介质的规格及性能
附录7 常用生物化学仪器使用方法
前辅文
第1章 蛋白质
1.1 蛋白质性质、序列和浓度的测定
实验1 蛋白质的氨基酸组分分析
实验2 蛋白质、多肽N端氨基酸残基的鉴定
实验3 蛋白质二硫键位置的确定
实验4 蛋白质变、复性实验
实验5 蛋白质相对浓度的测定
实验6 蛋白质绝对浓度的测定
1.2 蛋白质分离纯化
实验7 蛋白质的盐析沉淀
实验8 尺寸排阻色谱
实验9 离子交换层析
实验10 疏水层析
实验11 亲和层析
实验12 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验13 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验14 等电聚焦电泳
实验15 双向电泳
实验16 免疫印迹
1.3 蛋白质-蛋白质相互作用
实验17 化学交联
实验18 免疫共沉淀
实验19 捕拉分析
实验20 酶联免疫吸附
实验21 等温滴定量热
实验22 微量热泳动
实验23 表面等离子共振
实验24 共振能量转移
实验25 蛋白质片段互补
实验26 细胞内邻近标记
实验27 噬菌体展示
实验28 酵母双杂交系统
1.4 蛋白质三维结构测定
实验29 X射线晶体衍射法
实验30 核磁共振波谱
实验31 冷冻电子显微镜三维重构
综合实验1 利用超高分辨质谱技术鉴定蛋白质组
综合实验2 蛋白质的提纯、结晶、活性测定及三维结构解析
综合实验3 绿色荧光蛋白的重组表达、纯化及性质鉴定
第2章 酶
2.1 酶的性质和功能
实验32 酶催化活性影响因素的测定
实验33 酶动力学参数的测定
BOX1 酶催化协同效应的测定
2.2 酶的辅因子的性质和浓度测定
实验34 维生素B2的光谱分析
实验35 B族维生素的分离鉴定
实验36 维生素C的制备和定量测定
综合实验4 酵母蔗糖酶的分离纯化、性质鉴定及反应动力学实验
综合实验5 葡萄糖异构酶的分子克隆、异源表达、分离纯化和酶动力学分析
第3章 糖类
3.1 糖类的性质和浓度测定
实验37 糖类的鉴定及基本化学特性
实验38 还原糖的浓度测定
实验39 血糖的定量测定
实验40 单糖的定量测定
实验41 糖衍生物的检测
3.2 多糖的分离纯化和组成分析
实验42 多糖的分离纯化和组成分析
综合实验6 麦胚凝集素的制备及性质鉴定
第4章 脂质
4.1 脂质的性质和浓度测定
实验43 脂质的化学特性测定
实验44 血清胆固醇的定量测定
实验45 血清甘油三酯的定量测定
实验46 维生素A的定量测定
4.2 脂质的分离和鉴定
实验47 脂质的分离
实验48 脂质的鉴定
第5章 核酸
5.1 核酸的物理、化学性质和定量测定
实验49 DNA和RNA的区分
实验50 DNA双链的变性与复性
实验51 核酸的定量测定
5.2 核酸的生物学功能
实验52 质粒DNA的提取、酶切与鉴定
实验53 聚合酶链反应
实验54 逆转录PCR和实时荧光定量PCR
实验55 PCR产物的T-A克隆及重组子的蓝白斑筛选
实验56 DNA印迹分析
实验57 RNA印迹分析
实验58 电泳迁移率变动分析
BOX2 DNA是遗传物质的证明
综合实验7 蛋白质的无细胞体外转录和翻译
第6章 物质代谢
6.1 糖代谢
实验59 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成
实验60 α-葡萄糖苷的水解
6.2 氧化磷酸化
实验61 线粒体组分的分离和呼吸链复合体的酶学分析
实验62 细胞色素c的制备及含量测定
实验63 ATP合酶的分离纯化
6.3 脂代谢
实验64 脂肪的降解
实验65 脂肪酸的β氧化
6.4 核酸代谢
实验66 单细胞凝胶电泳检测DNA损伤
BOX3 DNA的半保留复制
6.5 蛋白质代谢
实验67 谷丙转氨酶的转氨基作用及活性测定
实验68 血清和尿液尿素的测定
6.6 激素代谢
实验69 甲状腺素浓度的测定
实验70 雌二醇浓度的测定
实验71 肾上腺素诱导细胞产生cAMP及ERK1/2蛋白磷酸化的测定
实验72 胰岛素对血糖浓度的影响
实验73 一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的测定
综合实验8 细胞氧化磷酸化和糖酵解功能测定
综合实验9 雌激素的提取、纯化和浓度测定
BOX4 血液不同生化指标与人体各器官功能的关系
第7章 生物信息学应用
实验74 生物信息学软件和网站的应用
实验75 依托京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库进行代谢基因、代谢通路、代谢产物及相关的生理病理效应分析
实验76 蛋白质三维结构的预测和模型构建
附录
附录1 生物化学实验室安全守则
附录2 实验报告撰写规则
附录3 试剂的配制和分级
附录4 硫酸铵饱和度计算表
附录5 常用缓冲液的配制
附录6 层析中常用介质的规格及性能
附录7 常用生物化学仪器使用方法
前辅文
第1章 蛋白质
1.1 蛋白质性质、序列和浓度的测定
实验1 蛋白质的氨基酸组分分析
实验2 蛋白质、多肽N端氨基酸残基的鉴定
实验3 蛋白质二硫键位置的确定
实验4 蛋白质变、复性实验
实验5 蛋白质相对浓度的测定
实验6 蛋白质绝对浓度的测定
1.2 蛋白质分离纯化
实验7 蛋白质的盐析沉淀
实验8 尺寸排阻色谱
实验9 离子交换层析
实验10 疏水层析
实验11 亲和层析
实验12 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验13 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
实验14 等电聚焦电泳
实验15 双向电泳
实验16 免疫印迹
1.3 蛋白质-蛋白质相互作用
实验17 化学交联
实验18 免疫共沉淀
实验19 捕拉分析
实验20 酶联免疫吸附
实验21 等温滴定量热
实验22 微量热泳动
实验23 表面等离子共振
实验24 共振能量转移
实验25 蛋白质片段互补
实验26 细胞内邻近标记
实验27 噬菌体展示
实验28 酵母双杂交系统
1.4 蛋白质三维结构测定
实验29 X射线晶体衍射法
实验30 核磁共振波谱
实验31 冷冻电子显微镜三维重构
综合实验1 利用超高分辨质谱技术鉴定蛋白质组
综合实验2 蛋白质的提纯、结晶、活性测定及三维结构解析
综合实验3 绿色荧光蛋白的重组表达、纯化及性质鉴定
第2章 酶
2.1 酶的性质和功能
实验32 酶催化活性影响因素的测定
实验33 酶动力学参数的测定
BOX1 酶催化协同效应的测定
2.2 酶的辅因子的性质和浓度测定
实验34 维生素B2的光谱分析
实验35 B族维生素的分离鉴定
实验36 维生素C的制备和定量测定
综合实验4 酵母蔗糖酶的分离纯化、性质鉴定及反应动力学实验
综合实验5 葡萄糖异构酶的分子克隆、异源表达、分离纯化和酶动力学分析
第3章 糖类
3.1 糖类的性质和浓度测定
实验37 糖类的鉴定及基本化学特性
实验38 还原糖的浓度测定
实验39 血糖的定量测定
实验40 单糖的定量测定
实验41 糖衍生物的检测
3.2 多糖的分离纯化和组成分析
实验42 多糖的分离纯化和组成分析
综合实验6 麦胚凝集素的制备及性质鉴定
第4章 脂质
4.1 脂质的性质和浓度测定
实验43 脂质的化学特性测定
实验44 血清胆固醇的定量测定
实验45 血清甘油三酯的定量测定
实验46 维生素A的定量测定
4.2 脂质的分离和鉴定
实验47 脂质的分离
实验48 脂质的鉴定
第5章 核酸
5.1 核酸的物理、化学性质和定量测定
实验49 DNA和RNA的区分
实验50 DNA双链的变性与复性
实验51 核酸的定量测定
5.2 核酸的生物学功能
实验52 质粒DNA的提取、酶切与鉴定
实验53 聚合酶链反应
实验54 逆转录PCR和实时荧光定量PCR
实验55 PCR产物的T-A克隆及重组子的蓝白斑筛选
实验56 DNA印迹分析
实验57 RNA印迹分析
实验58 电泳迁移率变动分析
BOX2 DNA是遗传物质的证明
综合实验7 蛋白质的无细胞体外转录和翻译
第6章 物质代谢
6.1 糖代谢
实验59 发酵过程中无机磷的利用和ATP的生成
实验60 α-葡萄糖苷的水解
6.2 氧化磷酸化
实验61 线粒体组分的分离和呼吸链复合体的酶学分析
实验62 细胞色素c的制备及含量测定
实验63 ATP合酶的分离纯化
6.3 脂代谢
实验64 脂肪的降解
实验65 脂肪酸的β氧化
6.4 核酸代谢
实验66 单细胞凝胶电泳检测DNA损伤
BOX3 DNA的半保留复制
6.5 蛋白质代谢
实验67 谷丙转氨酶的转氨基作用及活性测定
实验68 血清和尿液尿素的测定
6.6 激素代谢
实验69 甲状腺素浓度的测定
实验70 雌二醇浓度的测定
实验71 肾上腺素诱导细胞产生cAMP及ERK1/2蛋白磷酸化的测定
实验72 胰岛素对血糖浓度的影响
实验73 一氧化氮浓度和一氧化氮合酶活性的测定
综合实验8 细胞氧化磷酸化和糖酵解功能测定
综合实验9 雌激素的提取、纯化和浓度测定
BOX4 血液不同生化指标与人体各器官功能的关系
第7章 生物信息学应用
实验74 生物信息学软件和网站的应用
实验75 依托京都基因和基因组百科全书（KEGG）数据库进行代谢基因、代谢通路、代谢产物及相关的生理病理效应分析
实验76 蛋白质三维结构的预测和模型构建
附录
附录1 生物化学实验室安全守则
附录2 实验报告撰写规则
附录3 试剂的配制和分级
附录4 硫酸铵饱和度计算表
附录5 常用缓冲液的配制
附录6 层析中常用介质的规格及性能
附录7 常用生物化学仪器使用方法
