第1篇植物细胞与组织制片原理 1
第1章植物制片的目的和方法 2
1.1植物制片简介 2
1.1.1植物制片目的 2
1.1.2植物制片方法 2
1.2植物制片常用仪器、用具、药品 3
1.2.1主要仪器设备 3
1.2.2主要玻璃器具 6
1.2.3一般用具 7
1.3植物制片一般流程 7
1.3.1一般制片 7
1.3.2石蜡 半薄切片 8
1.4植物制片相关常用技术 8
1.4.1清洁技术 8
1.4.2封边与封片（藏）技术 9
1.4.3切片刀的磨刀技术 9

第2章植物制片的原理 11
2.1选材 11
2.1.1材料的选择 11
2.1.2材料的切取 11
2.2杀死、固定与保存 13
2.2.1杀死、固定与保存概述 13
2.2.2固定的基本原理 13
2.2.3常用的固定剂 14
2.2.4固定操作注意事项 21
2.3洗涤 22
2.3.1洗涤的作用 22
2.3.2洗涤的方法 23
2.4脱水剂与脱水 23
2.4.1脱水 23
2.4.2常用的脱水剂 23
2.5透明剂与透明 25
2.5.1透明的作用 25
2.5.2常用的透明剂 25
2.6制片 26
2.7染色剂与染色 26
2.7.1染色的发现与染色原理 26
2.7.2染色剂的概念与性质 27
2.7.3染色剂的种类 28
2.8封固与封固剂 29
2.8.1水溶性封固剂 29
2.8.2糖浆封固剂 29
2.8.3树脂性封固剂 29
2.8.4其它封固剂 30

第3章常用染色剂及染色方法 31
3.1常用染色剂 31
3.1.1苏木精 31
3.1.2洋红 34
3.1.3番红O 36
3.1.4亮绿 36
3.1.5固绿 37
3.1.6孔雀绿 37
3.1.7甲基绿 37
3.1.8碘绿 38
3.1.9结晶紫 38
3.1.10橘红G 38
3.1.11曙红 39
3.1.12真曙红 39
3.1.13中性红 39
3.1.14酸性品红（复红） 40
3.1.15碱性品红（复红） 40
3.1.16刚果红 40
3.1.17甲苯胺蓝 41
3.1.18甲基蓝 41
3.1.19亚甲基蓝 42
3.1.20苏丹Ⅲ 42
3.1.21苏丹Ⅳ 42
3.1.22苯胺蓝 42
3.1.23地衣红 43
3.1.24天青石蓝 43
3.1.25苦味酸 43
3.1.26俾斯麦棕 43
3.1.27玫瑰红 44
3.1.28詹纳斯绿 44
3.1.29红四氮唑 44
3.1.30间苯三酚 45
3.2染色方法 45
3.2.1染色方法的种类 45
3.2.2常用的染色方法与步骤 46
3.3染色中必须注意的几个问题 55
3.3.1染色液浓度 55
3.3.2染色温度与时间 55
3.3.3固定液对于染色的影响 55
3.3.4染色时应注意的几个问题 55


第2篇植物细胞与组织制片方法和技术 56
第4章石蜡切片法 57
4.1取材、固定、保存、洗涤 57
4.1.1取材 57
4.1.2固定 57
4.1.3冲洗 57
4.2脱水、透明 58
4.2.1脱水 58
4.2.2透明 59
4.3浸蜡 60
4.4包埋 60
4.4.1包埋方法 60
4.4.2包埋石蜡选择 61
4.5修块、切片 61
4.5.1修块、粘固 62
4.5.2组织切片机的结构及操作步骤 62
4.5.3切片注意事项 64
4.6粘片、展片、烤片（烘片） 65
4.7脱蜡、复水、染色、脱水、透明 66
4.8封片 66

第5章半薄切片技术 68
5.1水溶性树脂包埋 68
5.1.1GMA包埋法 68
5.1.2Quetol 523包埋 71
5.1.3JB-4包埋 71
5.1.4Lowicryl K4M包埋法 73
5.2环氧树脂包埋法 73
5.2.1环氧树脂包埋的机制和配方 73
5.2.2材料洗涤、脱水 76
5.2.3渗透与聚合 76
5.3修块和切片 76
5.3.1修块 76
5.3.2切片刀 77
5.3.3切片注意事项 77
5.4染色 77

第6章非切片制片 79
6.1暂时封藏 79
6.1.1简易观察制片 79
6.1.2孢子及花粉粒萌发观察制片 79
6.2整体制片 80
6.2.1甘油法 80
6.2.2甘油冻胶法 81
6.2.3甘油-二甲苯法 81
6.2.4糖浆法 82
6.2.5水封藏法 82
6.2.6松节油法 82
6.3涂压制片 83
6.3.1涂压法的基本步骤 83
6.3.2植物花粉母细胞的涂片法 84
6.3.3植物根尖、茎端的压片法 85
6.4离析制片 86
6.4.1硝酸-氯化钾离析法 86
6.4.2铬酸-硝酸离析法 87
6.4.3乙酸-过氧化氢离析法 87
6.4.4煮沸法 87
6.4.5盐酸-草酸离析法 87
6.4.6氨水离析法 88
6.4.7氢氧化钠离析法 88
6.4.8乙醇-盐酸离析法 88
6.4.9次氯酸钠法 88
6.5透明制片 88
6.5.1乳酸-苯酚透明法 88
6.5.2氢氧化钠透明法 89
6.5.3冬青油透明法 89
6.5.4甘油透明法 89

第7章植物细胞与组织显微测定 90
7.1碳水化合物显微测定 90
7.1.1高碘酸-希夫反应——显示多糖（淀粉粒及细胞壁纤维素等） 90
7.1.2碘-碘化钾反应——显示淀粉粒 91
7.1.3氯化铁羟胺反应——显示果胶 92
7.1.4氯碘化锌反应——显示纤维素 92
7.1.5氯代亚硫酸盐法——显示木质素 92
7.1.6苯胺蓝荧光法——显示胼胝质 93
7.1.7亚硫酸铁反应——显示单宁 93
7.1.8银还原法——显示维生素C 93
7.2脂类显微测定 94
7.2.1苏丹染料染色法——显示全部脂类 95
7.2.2尼罗蓝法——显示中性脂肪及酸性类脂 95
7.2.3锇酸染色法——显示中性不饱和脂类 95
7.2.4酸性氧化苏木精法——显示磷脂 96
7.2.5过甲酸-希夫法——显示含不饱和键的脂类 96
7.2.6丙二醇苏丹法——显示类脂 97
7.3蛋白质的显微测定 97
7.3.1汞-溴酚蓝法——显示总蛋白质 97
7.3.2茚三酮（或四氧嘧啶）-希夫反应——显示总蛋白质 98
7.3.3氯胺-T-希夫试剂反应——显示总蛋白 98
7.3.4固绿染色法——显示总蛋白质或碱性蛋白 99
7.3.5偶联四唑反应——显示含色氨酸、组氨酸和酪氨酸的蛋白质 99
7.3.6重氮化偶联反应——显示含酪氨酸蛋白质 100
7.3.7Sakaguchi反应——显示含精氨酸蛋白质 101
7.3.8对二甲氨基苯甲醛反应——显示含色氨酸蛋白质 102
7.3.9铁氰化铁法——显示蛋白质—SH 102
7.3.10汞橙（RSR）法——显示蛋白质—SH 102
7.3.11巯基乙酸-铁氰化铁法——显示蛋白质—SS— 103
7.3.12过甲酸-希夫试剂反应——显示含—SS—蛋白质 104
7.3.13过甲酸-Alcian蓝法 104
7.4核酸的显微测定 105
7.4.1福尔根反应——显示DNA 105
7.4.2甲基绿-派洛宁（焦宁）染色法——显示DNA与RNA 105
7.4.3苏木精染色法 106
7.4.4铁矾-苏木精染色法 107
7.5酶的显微测定 107
7.5.1联苯胺反应——显示过氧化物酶 107
7.5.2氯化三苯基四氮唑（TTC）法——显示脱氢酶 108
7.5.3四氮唑盐反应——显示琥珀酸脱氢酶 108
7.5.4Nadi反应——显示细胞色素氯化酶 108
7.5.5铅沉淀法 109
7.5.6钙-钴沉淀法——显示碱性磷酸酶 112
7.5.7钙皂沉淀法——显示酯酶 112
7.5.8靛蓝法——显示酯酶 113
7.5.9邻苯二酚法——显示多酚氧化酶 113
7.6细胞壁成分显微测定 114
7.6.1纤维素测定 114
7.6.2木质素测定 115
7.6.3角质、栓质测定 115
7.6.4果胶质测定 115
7.7活体染色 116
7.7.1线粒体活体染色 116
7.7.2液泡活体染色 116

第8章其它切片技术 117
8.1徒手切片 117
8.1.1徒手切片法的应用及优缺点 117
8.1.2徒手切片操作过程 117
8.1.3过程小结 118
8.2滑走切片 119
8.2.1滑走切片方法和步骤 119
8.2.2材料的软化处理方法 119
8.3蒸汽切片 120
8.4冰冻切片 121
8.4.1冰冻的原理 121
8.4.2利用专用冰冻切片机和干冰进行切片 121
8.4.3切片过程 121
8.4.4半导体式冷冻切片机 122
8.4.5恒冷箱式冷冻切片机 122
8.5木材切片 122
8.5.1直接切片 122
8.5.2包埋切片 123


第3篇植物组织与细胞研究实验操作 124
实验1刮片制片观察植物叶表皮 125
实验2胶带粘取制片观察植物叶片表皮 128
实验3次氯酸钠法制片观察植物叶片表皮 130
实验4印痕制片观察植物表皮 132
实验5石蜡切片观察叶片结构 135
实验6离析制片观察植物叶肉细胞 138
实验7小麦茎结构徒手切片 140
实验8胞间连丝制片观察 142
实验9解剖法分离禾本科植物胚囊 144
实验10压片法分离植物胚囊 146
实验11酶解法分离植物胚囊 148
实验12松属花粉粒制片 150
实验13棉胚乳整体制片 152
实验14橘果皮分泌腔制片 154
实验15石蜡切片观察植物线粒体 156
实验16植物液泡活体观察 158
实验17植物导管分离装片 160
实验18JB-4半薄切片 162
实验19石蜡切片高碘酸-希夫试剂染色 164
实验20花粉活力测定 166
实验21花生子叶切片 168
实验22胚囊整体染色切片法 170
实验23胚囊整体染色透明法 172
实验24子房整体透明观察 174
实验25植物线粒体提取观察 176
实验26叶绿体分离与观察 178


附录植物制片常用试剂配制与使用 180

参考文献 188